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食用菌多肽的制备

日期: 2017-03-22
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食用菌多肽的制备

 肽类在线 2017-03-22

 自然界中有成千上万种食用菌种,目前已知我国食用真菌938种。研究表明,食用真菌具有抗肿瘤、增强免疫功能、调节血脂、保肝解毒作用、降血糖、降血压等保健功能。食用菌中富含多糖、蛋白质、氨基酸、核酸、维生素、矿物质和膳食纤维等营养成分,食用菌中的菇类(干菇)蛋白质含量一般在15%-35%左右,其氨基酸组成全面,大多含有人体必需的八种氨基酸。目前的研究主要集中在食用菌多糖、三萜类化合物等,对食用菌多肽的研究和报道不多,而且大多食用菌在提取多糖后,被作为残渣废弃不用,浪费了大量的食用菌蛋白和多肽等营养物质。

生物活性肽是与机体生活动息息相关的一类具有生理活性功能的化合物,由多个氨基酸通过肽键连接而成,具有多种生理功能,如降血压、降胆固醇、降血糖、抗氧化、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗疲劳、免疫调节等。随着生物活性肽的相关研究越来越深入,食用菌源活性多肽引起了研究者的广泛关注。

目前已从食用菌中分离并鉴定出结构的生物活性肽主要有灵芝肽、云芝糖肽、茶树菇肽、双孢蘑菇肽、侧耳菌肽、白蘑菇肽等。

灵芝肽  谢东杨等从灵芝中分离纯化出一种单亚基多肽,被证实是一种脱氧核糖核酸酶,其N端氨基酸序列为PLDTGRYHYTW/T/CDGG。何慧等研究发现分离得到的灵芝肽具有良好的抗氧化作用和保肝作用,对四氯化碳(Heetal.2008)、D-半乳糖胺(Shietal.2008)、卡介苗/脂多糖(石燕玲等2008)等多种毒物诱导的小鼠肝损伤均有良好的保护作用

云芝糖肽  云芝糖肽(PSP)是从云芝深层菌丝体中提取出的一种主要活性成分,是一种多肽与多糖通过共价键紧密结合的化合物,研究发现云芝糖肽在提高免疫力和抗肿瘤和抗癌方面具有显著的药理活性,目前的研究主要集中在其免疫调节的机制和其诱导癌细胞凋亡的作用机制和对癌细胞的抑制机制方面。

茶树菇肽 研究发现从茶树菇中分离出的多肽具有抗菌、降血压和抑制癌细胞增殖作用。

双孢蘑菇肽双孢蘑菇蛋白质含量较高,含有人体所需的八种氨基酸。Ching Ching Lau等通过液质联用从双孢蘑菇中鉴定出8ACE抑制肽,其中三种AHEPVKRIGLFPSSNK在浓度63116129μMACE抑制活性最强。

侧耳菌肽  2005年,KTchu等从侧茸子实体中分离纯化得到一个具有一定抑菌活性的分子量为7kDa的肽。2011年,Jeong-Hoonjang等从侧耳菌子实体中鉴定出两种ACE抑制肽,氨基酸序列分别为RLPSEFDLSAFLRARLSGQTIEVTSEYLFRH,分子量分别为1622.852037.26Da

灰树花肽  2001年,choi等从灰树花提取液中分离纯化出一种结构为Val-Ile-Glu-Lys-Tyr-Pro6肽,具有较高的ACE抑制活性,其IC500,13mg

白蘑菇肽  2004年,Lee等从白蘑菇春提取中分离出一种具有降血压活性的3肽,其结构为Gly-Glu-Pro,其IC500.04mg

上述食用菌源活性肽大多因为这些食用菌长期以来的药食同源属性而得以发现,但近年来,越来越多的普通食用菌源多肽也受到了研究者的关注,如杏鲍菇、金针菇、香菇、猴头菇等不仅对其多肽的功能结构进行了研究,更是对其制备方法进行了细致深刻的研究,为其在食品产业的应用奠定了良好的基础。

2011年,李桂峰等采用响应面法对木瓜蛋白酶酶解双孢菇蛋白制备抗氧化肽的最优工艺进行了研究,确定制备抗氧化肽的最佳条件是:时间4.11h[E]/[S]3.79%,温度54.76℃。在此条件下酶解液的·OH清除率和O2-清除率分别为89.61%60.63%。酶解液抗氧化肽经SephadexG-50凝胶层析法分析,相对分子质量主要分布在6002600之间。

2012年,李桂峰等采用响应面分析法对金针菇蛋白的酶解工艺进行了优化,并对酶解产物的抑菌活性进行了测定,结果表明,酶解时间4.59h[E]/[S]4.73%,温度58.62℃。在此条件下,水解度为45.94%,抑菌圈直径为17.58mm

2014年,程菲儿等采用碱性蛋白酶酶解碱溶酸沉得到的杏鲍菇蛋白制备杏鲍菇多肽(水解度为81.19%),结果表明,杏鲍菇多肽对DPPH·的清除率为85.94%O2·的清除率为80.66%,脂质过氧化抑制率为45.57%;同时多肽具有很好的乳化稳定性,其在2%浓度时,乳化稳定性可达206;此外其对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌有较强的抑制作用,抑菌率分别为57.7%55.5%87.1%

2016年,宁庆鹏等以香菇为原料,经过一系列蛋白酶酶解条件的优化,得到香菇多肽的最佳酶解工艺为:加酶量3000U/gpH9.0,温度45℃,酶解时间4h,在此条件下酶解得率为92.7%10005000u和<1000u两部分,其中分子
量<1000u的寡肽的比例占总多肽的68.38%

2016年,蒋益等对灵芝发酵菌渣酶解制备抗氧化肽进行了研究,实验结果表明获得的肽粉多肽含量达67%,其中分子量小于2000Da的占95.74%。,经液质联用鉴定该组分含有相对分子质量为475.2Da,氨基酸序列为GluSer-Ala-Gly-Leu的肽段。

总之,食用菌源多肽逐渐成为人们研究的热点,其功能特性也将日渐清晰,对食用菌源多肽的广泛关注和深入研究,必将为其在食品产业中的开发应用提供广阔的市场前景。

 

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